藻类检测方法|置式显微镜法

发布时间:2022-03-28

1、藻类检测和计数新办法——置式显微镜法

因为环境污染,一些湖泊富营养化程度不断加重,导致水中藻类的快速增长。很多藻类的存在,直接影响了自来水的出产和供应。为了了解藻类对水厂各工艺环节的影响,以湖泊水为水源的许多水厂都相继开展了藻类计数检测项目。国内遍及选用的办法是将1L水样加鲁戈试剂固定在一个容器中,自然沉降24h后,利用虹吸的办法吸去上清液,并浓缩定容到30~50mL,然后取1mL放入血球计数板,在正置式显微镜下进行镜检计数[1]。此办法因为所需的水样较多(1L),在需要收集多个水样时,收集和运送的作业量大;在沉样时还要屡次冲刷搬运,增加了发生差错的机会,并且操作不便。昆明自来水总公司的水源之一是富化程度较高的滇池水,因此昆明水司较早开展了此项目,并得到了瑞士苏黎世供水局的技术支持和大力帮助。我们所选用的藻类计数办法的特点是运用倒置式显微镜,藻样通过沉样板一步沉降到位,与国内遍及选用的办法相比具有精确便利,水样用量少,运送便利,无须屡次冲刷搬运,操作简单等长处,适用于出产和科研检测。

1.用品预备

(1)沉样板。由一个长12cm,宽4.1cm,中央有圆形凹槽(底面积为5cm2)的长方形有机玻璃板和一个可滑动的、底部与凹槽形状彻底符合的空心圆筒(容积为25mL)以及一块圆形盖玻片组成,有机玻璃板的左边有一小孔,用于放掉上清液。

(2)倒置式显微镜。与一般倒置式显微镜不同的是,它的载物台经简单改造,增加了一个长方形的金属框,巨细恰好可放置沉样板。金属框的作用是将沉样板固定在载物台上,使沉样板可与载物台同步移动,避免沉样板发生偏移。两个目镜,一个装有微型刻度尺,可直接测量藻类的巨细和长度,另一个装有“  ”形标尺,在讦数时用它界定讦数范围。

(3)250mL试剂瓶。用于盛装水样。

(4)移液管(1~25mL)。

2.药品预备

①鲁戈试剂(Lugols Solution);②福尔马林(40%);③洒精(50%)。

3.办法与过程

3.1取样

先在250mL试剂中参加6~7滴鲁戈剂,再参加200mL,左右水样,摇匀。假如水样需保存较长时间,可参加适量福尔马林(40%)。

3.2沉降

用移液管取适量水样参加沉样板,再参加蒸馏水至满,加盖圆玻片,静沉24h。取多少水样,同藻类的多寡而定,藻类数量多可少取,数量少可多取,一般水样体积在1~25mL之间。

3.3计数

将沉样板上的圆筒用盖玻片推开,放掉上清液,置于显微镜上,以目镜上的“工工”形标尺为界线,随机选取若干条带计数。

一般状况是这样计数的;①在10×16倍镜头下,计数全部视野(1cm2)内的大型藻类。②在×25的倍镜下,随机选取5条带,计数基中的中型藻类。③在10×40倍的镜头下,随机选取1条带,计数其中的微型藻类。

在实践运用中,可根据当地的原水藻类状况,确定所选取的条带数。

3.4核算

藻类检测方法

式中N ——1mL;

5——沉样板板底部圆形凹槽的底面积,cm2;

S——每个计数条带的面积,cm2;

A——选取的条带数;

V——水样体积;mL;

N——实践数的A个条带的藻类个数。

将上述三个放大倍数下计数得的藻类依上式分别核算,再相加,即得到藻类总数。

3.5清洗

计数结束,用蒸留水冲刷沉样板,浸泡于50%的酒精中过认,再次用蒸留水冲刷后,晒干待用。

4.留意事项

(1)沉样前,要将水样摇匀

(2)将沉样板的圆筒推开时,要防止发生气泡。

(3)将沉样板置于显微镜上时,要尽量保持平衡,避免藻类向一侧歪斜。

(4)在选取计条带时,既要留意随机性,又要留意均匀性。

5.实践样品检测

取某水厂原水用上述办法(简称倒置法)和国内遍及选用的传统办法(简称正置法)分别进行藻类检测和计数,成果见表1。

藻类检测方法

由表1可见,倒置法水样用量少,并有较高的精密度;正置法水样用量多,精密度较低,并且因为正置法运用的血球计数的容积所限(0.1m3),出现在计数框内的藻类品种也有限,假如需要分类计数,有必定局限性,不好操作。倒置法能够一边分类判定,一边分类计数,水样中存在的品种在1cm2的计数范围内基本都能看到,分类判定和计数的成果比较全面,操作也便利。别的,倒置法将水样一步沉降到位,省略了许多中间环节,减少了屡次冲刷 搬运带来的操作差错,从而提高了精确度。

6定论

利用倒置式显微镜进行藻类检测和计数的办法,比运用正置式显微镜的血球计数板法水样用量少,中间环节少,精确便利,精密度较高,在分类判定和计数时,操作较为便利。但该办法运用的沉样板国内尚无厂家出产,需要从国外购买。

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