快速测定水中藻类的办法

发布时间:2022-03-28

水中藻类传统的测定办法是将一定量的水样加鲁哥试剂因定,在筒型分液漏斗中进行自然沉积,48h后,凭借虹吸办法吸去上层清液,按要求浓缩定容到30—50ml,然后在镜下计数,由于固定沉降时刻较长,检测成果常滞后于出产和研究,影响了及时剖析和解决问题。为了解决这一问题,下文对传统的检测蚊法中的沉积浓缩进行了改进,摸索出一种快速测定藻类的办法,测定时刻缩至当天即可出成果,并且精确、牢靠,适用于出产和科研检测。

1测定原理

使用测大肠菌的抽滤设备,对检测水样进行抽滤,藻类被截留在滤膜(0.35—0.65μm)上,使用滤膜对藻细胞的吸附力并不强,用少数纯水在HJ-3型电磁拌和器上萃取4、5次就能将全部的藻细胞洗回水中。

滤膜的主要成分是硝化纤维素(CN),可深于丙酮,而丙酮对藻细胞形状基本没影响,当滤膜遇到丙酮后会变成通明胶液,不影响镜下调查检测。

由于丙酮易挥发,滤膜变干会恢复原型,为了确保藻细胞和滤膜的湿度,考虑到丙酮和甘油的相容性,甘油的吸潮性及自身的油脂性,能使藻细胞和滤膜在较长的时刻内保持湿润通明,因此,在丙酮溶剂中加了一定份额的甘油,但甘油太多,会影响滤膜的溶解。

2.试验办法

2.1抽滤萃取法

取适量水样,按100:1的量加鲁哥试剂固定,在装有滤膜的抽滤器上进行抽滤。取下滤膜,放到100ml的小烧杯里,有藻细胞的一面朝上,加5—8ml纯水;调好电磁拌和器转速,使液体拌和时不会向上溅出,将小烧杯放到拌和器上转1mim左右,取洗液。

加入纯水5—8ml纯水;重复上步聚;振洗5次,定空洗液至50ml,在显微镜下记数,计算公工:

N=[(A/Ac)×(Vs/V·Va)]×n

式中,N为每升原水样中的浮游植物数量(个·J-1);A为计数框的体积(ml);n为计数所得藻类数目(个)。

2.2验证法

将上述试验洗净后的滤膜放入一平面皿,在空调下或热源边(不要超过40℃)使滤膜稍枯燥,将滤膜放一载玻片上,加二至四滴滤膜通明液,使膜彻底溶解成通明胶液,盖上盖玻片,在CHK型显微镜下调查。

此办法也可用来验证传统沉积法中的弃液藻细胞丢失状况。

3 成果及剖析

取已知数量的小球藻9.643×105·1-1,按上述办法进行收回试验,成果见表1,两种办法在实际水样中的应用成果如表2所示。

传统沉积办法精确度低,平行样相对偏关在+15%;测验时刻较长,根据理论计算,小的藻为沉时刻需要60 ,我们试验静置学时刻为43H,常有一些较小的藻细胞随弃液丢失,并且在南方地区气温较高,藻细胞大都偏小,易发生丢失现象,丢失达30%以上。

抽滤萃取法能较好地阻挠藻细胞丢失,但由于滤敢太小,一般只能抽滤浊度10NTU以下的水,关于源水多只能抽滤200ML左右的水量,太多则滤孔就会被堵 而难以达到抽滤作用,所以存在取水量较少,影响代表性,如有条件,滤膜孔径可取在1.5-1.8M,关于低浊度的出厂水和滤后水,则不存在这个问题,可抽滤200-300ml水量,并且能精确地反映水中残存藻细胞的数量。

传统的沉积办法中由于染色时刻较长,藻细胞和杂质均被染成褐色,在镜下调查时,影响藻细胞的分 而抽滤萃取则没有这种问题,因为藻细胞还保存着很好的原本色泽(绝大多数为绿色)和形状,较容易与水中的细菌、真菌以及低等浮游动物、颗粒、纤维等区分开来。

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